Resultado Proyecto

Banco de Conservación de Recursos Genéticos de Animales Silvestres

Organismo financiador: Consejería de Medio Ambiente y Desarrollo Rural. Importe: 126.520 €. Duración: 2006-2007.

Equipo investigador

José Néstor Caamaño Gualdoni SERIDA
Enrique Gómez Piñeiro SERIDA
Carmen Díez Monforte SERIDA
Felix Mª Goyache Goñi SERIDA
Miguel Prieto Martín SERIDA
Alberto Espí Felgueroso SERIDA
Jaime Marcos Beltrán Consejería de Medio Ambiente y Desarrollo Rural

Avance de resultados

El objetivo principal de este banco genético es conservar material genético de especies de interés en forma de células somáticas, tejido (piel) y ADN. Las especies animales a las que se logró tener acceso y con las que se trabajó durante estos dos años son las siguientes:

• Oso pardo (Ursus arctos)
• Lobo (Canis lupus signatus)
• Delfín común (Delphinus delphis)
• Águila culebrera (Circaaetus gallicus)
• Gavilán (Accipiter nisus)
• Paiño común (Hydrobates pelagilus)
• Avutarda común (Otis tarda)
• Mochuelo común (Athene noctua)
• Buitre Leonado (Gyps fulvus)
• Tejón (Meles meles)

Se desarrollaron técnicas de manejo del ciclo celular en fibroblastos de oso pardo por citometría de flujo que permitieron conocer los estadíos del ciclo celular más adecuados en aplicaciones biotecnológicas (Figura 1). Además, la caracterización de las células somáticas preservadas en el banco es fundamental para conocer su futura viabilidad. Con el apoyo y colaboración de la Universidad de Oviedo se evaluó por citometría de flujo la vialidad de los fibroblastos de oso pardo por el método de Anexina. Se determinó que la viabilidad de las células somáticas de oso pardo, una vez congeladas, descongeladas y cultivadas fue superior al 82%. Estos resultados demuestran la eficiencia de las metodologías desarrolladas para la conservación de los fibroblastos.

Figura 1. Típicos histogramas de ADN obtenido usando citometría de flujo en fibroblastos de oso pardo cultivados bajo diferentes condiciones de cultivo.

Se logró desarrollar un método de congelación de piel que resultó efectivo en la conservación de piel de oso pardo. Se actuó sobre seis muestras obtenidas por biopsia de osos del Parque de la Naturaleza de Cabárceno. Dichas muestras fueron obtenidas en el año 2006 y se descongelaron y procesaron en el primer semestre de 2007, período durante el cual se evaluó la eficacia de la metodología desarrollada. El método de congelación de piel fue altamente eficaz, tanto en el aislamiento de las células de la piel, como en el crecimiento in vitro de las mismas. Sin embargo, la vitrificación de piel se mostró eficaz en el aislamiento de las células pero no lo fue tanto en el crecimiento y desarrollo in vitro (Tabla 1 y Figura 2).

En la actualidad el banco de recursos genéticos cuenta con protocolos eficaces para conservar células y tejido de especies animales de interés.

Tabla 1. Aislamiento y proliferación de fibroblastos de oso pardo provenientes de piel congelada, vitrificada y fresca.

 (*) La sexta muestra fue contaminada y, por tanto, descartada. ^{a, b, x, y} letras distintas en la misma columna implica valores significativamente diferentes (a,b: p<0,05; x,y: p<0,03)

Figura 2. Cultivo primario de fibroblastos de oso pardo provenientes de una biopsia de piel que fue vitrificada/descongelada.