Resultado Proyecto

Valoración no invasiva de la viabilidad de ovocitos de especies domésticas por Microscopia de Luz Polarizada

Referencia: RZ2007-00013-00-00. Organismo financiador: Instituto Nacional de Investigación y Tecnología Agraria y Alimentaria. Importe: 38.461 €. Duración: 2007-2010.

Equipo investigador

José Néstor Caamaño Gualdoni. SERIDA
Enrique Gómez Piñeiro. SERIDA
Carmen Díez Monforte. SERIDA
Marta Muñoz Llamosas. SERIDA
Emilio Martínez García. Universidad de Murcia
María Antonia Gil Corbalán. Universidad de Murcia
Cristina Cuello Medina. Universidad de Murcia

Entidades Colaboradoras

Laboratorio de Fertilización In Vitro. Facultad de Veterinaria de la Universidad Autónoma de Barcelona.
Facultad de Veterinaria. Departamento de Medicina y Cirugía Animal. Universidad de Murcia.

Avance de resultados

El objetivo del proyecto es evaluar la microscopia de luz polarizada como herramienta en la selección de ovocitos para su uso en técnicas de reproducción asistida para la conservación de especies domésticas y silvestres.

La maduración de ovocitos incluye una serie de eventos como los movimientos de los cromosomas y organelas a través de los microtúbulos. La formación del huso meiótico es crucial para la normal alineación de los cromosomas durante la meiosis y para la fertilización. La mayor parte de los métodos de evaluación del huso meiótico en ovocitos depende de la fijación y coloración de los microtúbulos, principalmente por inmunofluorescencia, lo cual imposibilita el uso del ovocito en fertilización in vitro, inyección intracitoplasmática de espermatozoides (ICSI), criopreservación y transplante nuclear.

La microscopia de luz polarizada ofrece una alternativa no invasiva para la evaluación del huso meiótico y es capaz de determinar el estado de maduración y predecir la calidad y viabilidad de los ovocitos.

El proyecto tiene tres objetivos:

1. Evaluar la aptitud de la microscopia de luz polarizada para determinar el estado de maduración de ovocitos madurados in vitro en las especies bovina, porcina, ovina y caprina.
2. Analizar el uso de la microscopia de luz polarizada para determinar la viabilidad de ovocitos madurados in vitro en las especies bovina y porcina.
3. Evaluar el uso de la microscopia de luz polarizada como método de selección de ovocitos antes de la criopreservación y después de la descongelación en bovinos.

Las actividades realizadas se centraron en la especie bovina y permitieron avanzar en el objetivo 2. Los primeros resultados obtenidos permitieron determinar que el uso de la microscopia de luz polarizada no afecta a la viabilidad de los ovocitos madurados in vitro de la especie bovina, en cuanto a su capacidad para desarrollarse como embrión tras la fertilización in vitro. Además, estos embriones mantienen inalterado el número de células y su distribución.