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Identificación, caracterización genética y conservación de levaduras no-Saccharomyces aisladas en sidras asturianas. Evaluación de sus actividades enzimáticas
Referencia: RM2006-00008-00-00. Organismo financiador: Instituto Nacional de Investigación y Tecnología Agraria y Alimentaria. Importe: 25.680 €. Duración: 2006-2009.
Equipo investigador
Belén Suárez Valles SERIDA
Rosa María Pando Bedriñana SERIDA
Equipo técnico
Ana Lastra Queipo SERIDA
Avance de resultados
Se evaluaron las actividades enzimáticas (poligalacturonasa, pectín-liasa, β-xilosidasa, β-glucosidasa y proteasa) de 420 cepas no-Saccharomyces pertenecientes a la colección de cultivos tipos del SERIDA. Todas las actividades fueron ensayadas en medios sólidos sobre placa, con la excepción de la actividad β-glucosidasa que se realizó en agar inclinado con arbutina como sustrato.
La actividad enzimática observada con mayor frecuencia (33,7%) fue la β-glucosidasa (tabla 1), la capacidad poligalacturonásica sólo se detectó en cepas pertenecientes al género Hanseniaspora, mientras que cepas de la especie Metschnikowia pulcherrima mostraron elevadas actividades glicosídicas y proteolíticas. Ninguna de las cepas desarrolló actividad pectín-liasa.
Tabla 1. Actividades enzimáticas de cepas no-Saccharomyces
|
Especie |
Cepas testadas |
Poligalacturonasa |
β-glucosidasa |
β-xilosidasa |
Proteasa (Gelatina) |
|
Hanseniaspora valbyensis |
202 |
1 |
33 |
2 |
12 |
|
Hanseniaspora uvarum |
77 |
5 |
38 |
7 |
13 |
|
Hanseniaspora osmophila |
42 |
2 |
15 |
2 |
7 |
|
Metschnikowia pulcherrima |
55 |
0 |
40 |
5 |
27 |
|
Candida parapsilosis |
42 |
0 |
14 |
0 |
2 |
|
Pichia guillermondii |
2 |
0 |
1 |
1 |
0 |
Respecto al estudio de la variablilidad genética, conviene resaltar que se pre-caracterizaron 97 cepas pertenecientes a las especies Candida parapsilosis y Mestchnikowia pulcherrima y 42 cepas pertenecientes a la especie Hanseniaspora osmophila mediante RAPD–PCR (Random Amplified Polymorphism Detection), utilizando el cebador OPA-03 (5´-AGTCAGCCAC-3´). La caracterización genética de las dos únicas cepas de la colección pertenecientes a la especie Pichia guillermondii, se realizó mediante el análisis de los fragmentos de restricción del ADN mitocondrial, resultando estirpes diferentes.