Proyectos SERIDA

Valoración no invasiva de la viabilidad de ovocitos de especies domésticas por Microscopia de Luz Polarizada

Dr. José Néstor Caamaño Gualdoni. (2007-2010)

La mayor parte de los métodos de evaluación del huso meiótico en ovocitos depende de la fijación y coloración de los microtúbulos, principalmente por inmunofluorescencia, lo cual imposibilita el uso del ovocito en fertilización in vitro, inyección intracitoplasmática de espermatozoides (ICSI), criopreservación y en transplante nuclear. Asimismo, la tinción con bisbenzimida permite observar la disposición de los cromosomas, pero exige someter al ovocito a una fuente de luz ultravioleta (UV), potencialmente genotóxica. La microscopia de luz polarizada ofrece una alternativa no invasiva para la evaluación del huso meiótico, la cual no habría de ser en principio deletérea para aquellos ovocitos sometidos más tarde a fertilización in vitro y otras tecnologías. Esta técnica permite determinar el estado de maduración y predecir la calidad y viabilidad de los ovocitos.

El objetivo del proyecto es la evaluación de esta técnica de micrscopia como herramienta en la selección de ovocitos que serán utilizados en técnicas de reproducción asistida destinados a la conservación de especies domésticas (Asturiana de los Valles y de la Montaña, oveja Xalda, cabra Bermeya y cerdo Asturcelta). Cuatro son los objetivos: 1. Evaluar la aptitud de la microscopia de luz polarizada para determinar el estado de maduración de los ovocitos madurados in vitro en las especies bovina, porcina, ovina y caprina; 2. Analizar el uso de esta microscopia para determinar la viabilidad de ovocitos madurados in vitro en las especies bovina y porcina; 3. Estudiar el uso de la microscopia de luz polarizada como método de selección de ovocitos antes de la criopreservación y después de la descongelación en bovinos; y 4. Evaluar la aptitud de esta tecnología para realizar la enucleación de ovocitos bovinos y porcinos. El conocimiento que se obtenga en el desarrollo del presente proyecto será de utilidad para la mejora de las técnicas de reproducción asistidas en bovinos, porcinos, ovinos y caprinos.

Resultados Preliminares

Resultado preliminar del año 2007.
Resultado preliminar del año 2008.
Resultado preliminar del año 2009.
Resultado preliminar del año 2010.